這里曾經是美第奇家族的事務所，文藝復興時期凝聚了美第奇家族財力的全部藝術作品都在這里，收藏品達2500件之多，是全世界收藏文藝復興時期藝術品最豐富的美術館。
美術館主要展室位于二層和三層。二層展出達·芬奇、米開朗基羅等人的素描及版畫，三層繪畫館有45間展室。從三層到河對岸的皮蒂宮之間的巴扎利走廊，展出達·芬奇、提茲亞諾等畫家們的自畫像。
重要藏品：
第2展室，喬托的《圣母子》（La Madonna in Maesta），他帶給文藝復興初期巨大影響。
第3展室，西莫內·麥爾蒂尼的《圣母領報》（Annunciazion），他是14世紀錫耶納派的重要畫家。
第7展室，弗拉·安捷利科的《圣母子》（La Madonna colBambino）及保羅·烏切羅的《圣羅馬諾之戰》（Battaglin di S．Romano），據說連畢加索也曾經每天去作素描。
第8展室，利比的作品。
第10-14展室，波提切利的《春》（Primavera）、《維納斯的誕生》（Nascita di Venere）。
第15-16展室，達·芬奇的《三王禮拜》（Adorazione dei Magi）。
第25展室，米開朗基羅的《圣家族》（Sacra Famiglia）。
第26展室，拉斐爾的《金翅雀的圣母》（Madonna del Cardellino）。
第28展室，提茲亞諾的代表作《厄比諾的維納斯》（Venere di Urbino）。
第43展室，卡拉巴喬的《依塞克的犧牲》（Sacrificio di Lsacco）。